第九章

　　第一节 菌种的衰退与复壮的概念

　　1、退化（衰退）：菌种在培养或保藏过程中，由于自发突变的存在，出现某些原有优良生产形状的劣化，遗传标记的丢失等现象，称为菌种的衰退。

　　原因：1、基因突变，主要原因，根本原因，基因突变引起的生产能力的下降，其中包括细胞内控制产量的基因突变或质粒脱落造成的。  2、分离现象。

　　3、连续移代（传代）：是加速退化发生的直接原因。

　　菌种退化的表现：

　　1、菌落、细胞形态发生变化，2、生长速度减慢，产孢子越来越少。3、抵抗力下降，抗不良环境能力下降。4、代谢产物生产能力下降，对宿主寄生能力下降。

　　2、菌种的复壮：狭隘的复壮是指菌种已发生衰退的情况下，通过纯种分离和生产性能测定等方法，从衰退的群体中找出未衰退的个体，以恢复原有菌体。

　　二、菌种复壮的措施：1、纯种分离（平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法），2、淘汰法（淘汰已衰退的个体），3、通过宿主体内生长进行复壮，4、采用有效的菌种保藏方法。

　　三、防止菌种衰退的方法：

　　采用减少传代，经常纯化，创造良好的培养条件，用单细胞移植传代和科学的保藏等措施，不但可以使菌种保持优良的生产能力，而且还能是已退化的菌种得到恢复提高。

　　第二节 菌种保藏

　　目的：1、存活、不丢失、不污染，2、防止优良性状丧失，3、随时为生产，科技提供优良品种。

　　方法：1、低温保藏法（斜面保藏方法）：菌种管置于4度冰箱保藏，定时传代。原理：低温下，微生物代谢强度明显下降。   2、液体石蜡油低温保藏法：橡皮塞取代棉塞，加石蜡油。  3、干燥保藏法（沙土保藏法、滤纸保藏法……）。

　　4、真空冷冻干燥法：适用于各种微生物，便于大量保藏，菌种生长时间长。

　　5、液氮超低温保藏法：讲菌种置于保护剂中，预冷冻之后保护在液氮超低温冰箱中，使用于各种微生物的的较理想的保藏方法。

　　相关链接：2013年自考《微生物遗传学》考点